martes, 22 de marzo de 2011

Extracción de ADN de células animales.

EXTRACCIÓN DE ADN DE CÉLULAS ANIMALES (pendiente)

MATERIAL:

- Hígado de pollo                             - Lavavajillas
- Mortero                                         - Zumo de piña
- Pipeta                                            - Papel de filtro
- Probetas                                        - Varillas de vidrio
- Alcohol etílico de 96º                      - Embudos

MÉTODO EXPERIMENTAL:
          
                      Tritura un higadito de pollo en un mortero. Añade al triturado 200 ml de agua destilada y remueve hasta hacer una especie de papilla. La papilla debe quedar opaca, nunca transparente.

                       Filtra varias veces la papilla en un embudo con papel de filtro sobre una probeta. Vierte la pasta que queda en el filtro en otra probeta y anota el volumen.

                      Añade una cantidad de detergente equivalente a una cuarta parte del volumen de la pasta. Remueve suavemente hasta que la pasta quede homogénea.

                      Añade 10 ml de zumo de piña y sigue removiendo la mezcla unos cinco minutos.

                      Vierte la mezcla en otra probeta más ancha y añade poco a poco con una pipeta 50 ml de alcohol frío. El alcohol debe resbalar por las paredes de la probeta para evitar que se mezcle con la pasta.

                      Dejar reposar la mezcla son agitar ni remover. Al cabo de unos minutos verás que se forman dos fases: en el fondo estará el agua con las proteínas y en la parte superior estará el alcohol con el ADN en forma de filamentos blancos. Sumerge la varilla de vidrio solo en la parte del alcohol y muévela siempre en la misma dirección hasta que los filamentos blancos se adhieran a la varilla.

                       ¡Ya has extraído el ADN del hígado!

                       Añade azul de metileno y obsrerva las fibras al microscopio.
                    
                       Completa la siguiente marcha analítica:



CUESTIONES:


  • 1) Sabiendo que el detergente crea un medio hipertónico y que emulsiona los lípidos, ¿qué efecto cree qe tiene sobre las membranas nucleares?
  • 2) Sabiendo que el zumo de piña es rico en una enzima llamada papaína. ¿ Qué efecto crees que tiene sobre la pasta de hígado?
  • 3) ¿Qué tipo de sustancia crees que es el azul de metileno para adherirse a los filamentos de ADN?
  • 4) Describe el ADN.

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